实验服务

EXPERIMENTAL SERVICE

外泌体鉴定-透射电镜

分类:外泌体服务   发布时间    阅读: 580

一、实验简介

外泌体(Exosomes)是细胞主动分泌的纳米级(40-200nm)细胞外囊泡,具有典型的脂质双分子层膜结构。它们广泛存在于血液、唾液、尿液、乳汁及细胞培养上清等生物体液中,作为细胞间通讯的关键信使,携带并传递蛋白质、mRNA、miRNA、DNA等重要功能分子,参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和肿瘤细胞生长等过程。

透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM)利用高压加速的电子束作为光源,波长极短,使得TEM拥有远超光学显微镜的分辨率(0.1-0.2 nm)和极高的放大倍数(可达数百万倍),能够清晰地揭示外泌体的亚显微结构,这是普通光学显微镜无法实现的。经TEM负染色的外泌体在图像中通常呈现为典型的“杯托状”(或称“茶托状”)双层膜结构。这种特征性的形态是由于外泌体在制样干燥过程中发生塌陷所致,已成为识别外泌体的重要标志之一。此外电镜图像还能反映外泌体样本的纯度,若存在过多的蛋白质聚合物、细胞碎片或其他非囊泡结构,则会直接影响图像质量和鉴定结论的可靠性。TEM是观测外泌体超微结构的“金标准”技术,能够直接可视化地确认外泌体的身份、形态和结构完整性,是外泌体鉴定体系中不可或缺的一环。

二、实验流程

1、样本固定:外泌体戊二醛固定。

2、外泌体电镜制样:采用负染色技术,载网吸附—染色—干燥。

3、上机观察与图像采集:染色好的铜网上机观察,根据实际情况选取合适倍数合适视野拍照。

三、注意事项

1、建议外泌体送样量为30-50μl(BCA≥0.2ug/ul),2.5%的戊二醛进行预固定。固定后的样本冰袋运输。

2、公司提供实验步骤、原始电镜图片和实验报告。

四、联系咨询

攸碧艾欢迎您来电咨询实验服务,联系电话:400-681-8582。