一、实验简介

Western Blot（WB，蛋白质免疫印迹）是从蛋白质水平鉴定外泌体的核心方法。其原理是基于抗原-抗体特异性结合，通过检测外泌体富集的特异性标志蛋白，从而确认外泌体的存在并评估其纯度。外泌体主要检测指标为CD63、CD9、CD81、Tsg101、Alix、HSP70等。

针对外泌体的WB定性检测，应检测2-3个阳性标志物，至少包括1个跨膜蛋白（如CD9、CD63、CD81）和1个胞质蛋白（如TSG101、Alix、HSP70），以证实外泌体的特征性成分。另外检测1个阴性标志物（如内质网蛋白Calnexin、高尔基体蛋白GM130、细胞核蛋白Histone 3），这些蛋白不应在外泌体中富集，其缺失可有效排除细胞碎片等污染，证明样本纯度。

攸碧艾生物提供专业、高效的外泌体WB鉴定服务，免费提供经过验证的高质量抗体。

二、实验流程

1、BCA法定量外泌体浓度。

2、WB检测：样本处理—制胶—SDS-PAGE电泳—转膜—封闭—孵育一抗二抗—显影成像。

三、注意事项

1、客户提供提取纯化好的外泌体样本。建议样本总量≥20μl，BCA法测定的总蛋白浓度≥1μg/μl。干冰运输。

2、公司提供基本实验步骤、原始图片、数据分析结果。

四、联系咨询

攸碧艾欢迎您来电咨询实验服务，联系电话：400-681-8582。