YOBIBIO EDTA脱钙液是一种主要用于去除骨组织、牙齿、钙化组织或病理标本中钙盐的脱钙试剂,可以最大程度保护组织的形态完整性和生物分子活性。
在病理实验制作切片时,一些含钙组织由于组织中的钙十分坚硬,一般不能直接制作切片。骨组织含钙量最多,除了骨组织之外其它组织也可发生钙化,在组织中形成钙化区。为达到含钙组织充分脱钙,又保护其抗原不受破坏的目的,需要固定含钙组织之后进行脱钙,然后再进行常规制片。
乙烯二胺四乙酸(EDTA)是一种水溶性二价离子螯合剂,是可逆性的金属蛋白酶抑制剂,可与金属离子如钙离子等形成络合物而抑制相应金属离子依赖性的酶促反应。EDTA与羟基磷灰石结晶的外层钙结合,形成可溶性的非离子化合物,同时又促进晶体内层的结合钙向外转移,借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融解,PH中性时可起螯合作用。其特点是脱钙时间长,对骨组织的损伤少,酶活性(碱性磷酸酶)和细胞抗原性保存较好,制作的切片可用于组织化学和免疫组化分析。
1、使用方便,无需稀释和配制,直接使用。
2、温和脱钙,利用EDTA的螯合作用选择性脱钙,无过度损伤。
3、保留组织形态、抗原性和核酸完整性。
1、以骨组织为例。将骨组织截成0.5cm×0.3cm×0.2cm大小骨片,生理盐水清洗后立即投入预冷的固定液中,4℃固定12-24h。固定结束后骨片在PBS中漂洗3次,每次20min。
2、将骨组织转移至20倍体积以上的EDTA脱钙液中,室温脱钙,每隔4-5天更换一次新的脱钙液,经过3次更换新液后,此后每天更换新液,每日检查脱钙情况,根据具体实验具体分析,以大头针能刺进骨密质为完成脱钙标准。
3、脱钙完成后,骨片用蒸馏水冲洗20min,重复数次后即可进行后续处理和检测。
1、为使脱钙充分,最好每次更换新的脱钙液,既可弃去脱掉的钙盐,增加脱钙强度,又可以降低脱钙温度。
2、脱钙时间以大头针能刺进骨密质为完成脱钙标准。
3、使用EDTA脱钙液脱钙后,组织可能会稍微变硬。
4、处理关节软骨组织样品时如果需要保存蛋白聚糖,请勿使用本脱钙液。
5、为了提高脱钙速度,骨组织取材尽量取薄,厚度尽量<5mm。
6、脱钙温度不要太高,一般以室温(25℃左右)为宜,高温可加快脱钙速度,但可能会破坏组织中的核酸而影响后续染色效果。低温(4℃)则会减慢脱钙速度,使组织在脱钙液中浸泡过久而损伤。
7、为了提高脱钙速度,可以采用微波加热脱钙。用微波炉辅助脱钙可以大大缩短脱钙时间,以微波(200W左右)间歇脱钙,每次加热1分钟,每次微波加热之间都将烧杯移至室温冷却5min,以保证脱钙液的温度不至于太高(<60℃)。脱钙时脱钙液温度过高,易引起骨组织松散解体、假阴性、背景色深等问题。因此在时间要求不紧迫的前提下,此方法也不应是首选。
8、脱钙应该彻底,在脱钙过程中须定时检查脱钙程度,以避免脱钙不足或者脱钙过度,应在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间。
9、应使用玻璃容器作为脱钙用具,避免使用金属容器。
10、骨组织应先固定再脱钙,避免先脱钙后固定,以减少对组织的损伤。
11、本产品仅作体外科研使用,不可用于临床诊断或治疗。
12、实验员请穿实验服并佩戴一次性手套操作,建议佩戴适当的防护眼镜。使用时注意有效防护,请勿接触人体,如果不慎接触,应立即用大量的水冲洗,若身体不适应立即前往医院治疗。
2-8℃保存,12个月有效。
仅限科研使用,不能应用于临床。
为确保信息准确,建议您以随产品附带的纸质说明书为准。电子文档内容可能因版本更新而存在延迟,仅供参考。
EDTA脱钙液
货号:YB2003
规格:500ml
价格:110 元
应用范围:
产品类型:
保存温度:4℃/室温
产地: YOBIBIO
库存:现货
EDTA脱钙液
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