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SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒

应用范围: 制备SDS-PAGE凝胶
产品类型: 凝胶制备试剂盒
保存温度: 4℃/-20℃
产地: YOBIBIO
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产品描述:

攸碧艾SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒提供了可以快速制备凝胶的上层胶和下层胶的预混溶液,无需计算所需试剂用量,无需稀释,无需额外添加TEMED,只需加入改良型促凝剂即可凝胶,可快速配制多块凝胶,使制胶过程更加便捷。本试剂盒中配备了彩色上层胶缓冲液,点样孔清晰易辨,方便点样,且所含颜色配方不影响电泳、染色及转膜等后续实验。

本产品可制备125块凝胶(0.75mm),具体可以配制的数量与凝胶的厚度及尺寸有关。

产品特点:

1、无需计算试剂用量,无需稀释,可快速灌制多块凝胶。

2、无需使用TEMED,不用忍受氨气味。

3、可提供6%、8%、10%、12%、15%五种常见浓度凝胶的快速制备,满足多种需求。

4、不同浓度凝胶使用不同颜色的上层胶区分,为点样和区分不同凝胶提供便利。

5、条带清晰,尤其小分子蛋白质条带比在传统凝胶中更清晰。

使用说明:

不同尺寸和厚度的凝胶所需试剂用量不同,以配制一块0.75/1.0/1.5mm的mini胶为例。

1、取等体积下层胶溶液和下层胶缓冲液,各2.0/2.7/4.0ml,在小量杯中混匀。

2、对应加入40/60/80μl的改良型促凝剂,混匀。

3、将步骤2中配制好的混合溶液注入制胶玻璃板中,使液面与短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5cm即可,加入适量水或醇(如异丙醇、正丁醇等)覆盖于下层胶之上。(注:此混合溶液为过量,请勿全部注入,应留少许在小量杯中,以判断凝胶状态)

4、待下层胶凝固后,倒去上层水或醇,用滤纸吸去多余的水或醇(注:当上层水或醇和下层胶之间有一条折射线时,说明胶已凝固,约为5-10min,以具体实际情况为准)

5、取等体积上层胶溶液和彩色上层胶缓冲液混匀,各0.5/0.75/1.0ml,在小量杯中混匀。

6、对应加入10/15/20μl的改良型促凝剂,混匀。

7、将步骤6中配制好的混合溶液,注入制胶玻璃板中,插入梳子,待上层胶凝固后拔去梳子即可进行上样电泳。(注:凝固时间约为10-15 min,以具体实际情况为准)


凝胶厚度

下层胶配方

上层胶配方

下层胶溶液

下层胶

缓冲液

改良型

促凝剂

上层胶溶液

彩色上层胶缓冲液

改良型

促凝剂

0.75mm

2.0μl

2.0μl

40μl

0.5μl

0.5μl

10μl

1.0mm

2.7μl

2.7μl

60μl

0.75μl

0.75μl

15μl

1.5mm

4.0μl

4.0μl

80μl

1.0μl

1.0μl

20μl


注意事项:

1、请根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,具体可参考下表。

SDS-PAGE分离胶浓度

最佳分离范围

6%

120-250kD

8%

80-200kD

10%

30-90kD

12%

15-40kD

15%

10-20kD


2、改良型促凝剂的使用量仅作参考,实际用量可根据个人实验习惯和经验调整,加入较多的促凝剂可加速凝胶,加入较少的促凝剂则会减慢凝胶速度。

3、凝胶速度与温度有显著的正相关性,温度越高,凝胶速度越快。当室温过高时,建议改良型促凝剂用量减半或酌情减少(如推荐使用量的1/4等),避免胶凝过快;当室温较低时,可适当延长凝胶时间。

4、本产品已加入适量TEMED的替代品,如需进一步加速凝胶,临配胶前可按需补充适量TEMED。

5、在配胶之前,将胶溶液及缓冲液在室温放置几分钟平衡至室温,可有效避免凝胶中气泡的形成。

6、由于颜料的理化性质,使用前请摇匀试剂。

7、配胶溶液中含有Acr-Bis,对人体有毒,小心操作并注意有效防护,以免直接接触人体或吸入体内。

8、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

9、本产品仅作体外科研使用,不可用于临床诊断或治疗。

10、实验员请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

保存方法:

改良型促凝剂长期储存需-20℃保存,其他成分可保存于4℃,有效期一年。

适用范围:

仅限科研使用,不能应用于临床。


为确保信息准确,建议您以随产品附带的纸质说明书为准。电子文档内容可能因版本更新而存在延迟,仅供参考。

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