红细胞裂解液是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液,主要有效成分为氯化铵,不适用于有细胞核红细胞的裂解(如鸟类的红细胞)。经过优化配方,在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。
本产品已过滤处理,溶液为澄清透明溶液。如果要使用该产品处理过的血液或组织细胞样品用于后续的原代培养、细胞融合等细胞培养实验,建议将本产品经过0.22μm过滤后再使用。如果使用该产品处理的样品进行核酸或蛋白提取及常规分析测试,可以直接使用该产品。
(一)组织细胞样本常规操作步骤
1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2、加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,室温或4℃条件下裂解1-2min。
3、400-500×g 4℃离心5min,弃红色上清。(如果发现红细胞裂解不完全,可以重复步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。)
4、加入细胞沉淀体积的5倍以上体积的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500×g 4℃离心2-3min,弃上清。可重复1次。
5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
(二)组织细胞样本快速操作步骤(无需洗涤)
1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2、细胞沉淀加入5倍细胞沉淀体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,室温或4℃条件下裂解1-2min。
3、加入100倍细胞沉淀体积的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,混匀。
4、400-500g 4℃离心5min,弃红色上清。(如果发现红细胞裂解不完全,可以重复步骤2和步骤3
一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。)
5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
注:常规步骤多一步洗涤过程中的离心,但可以节省洗涤液的用量,洗涤效果也更好,同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心,但洗涤效果略差,同时需要大体积的离心管。
(三)血液样本常规操作步骤
1、取新鲜抗凝血,400-500×g离心5min,离心弃上清。
2、加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,室温或4℃条件下裂解1-2min。(对于鼠的血液,裂解1-2min足够;对于人的外周血,宜延长裂解时间至4-5min,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。)
3、400-500g 4℃离心5min,弃红色上清。(如果发现红细胞裂解不完全,可以重复步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。)
4、加入细胞沉淀体积的5倍以上体积的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500×g 4℃离心2-3min,弃上清。可重复1次。
5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
注:对于微量或少量的血液样品,可不进行步骤1的操作,直接在步骤2中加入10倍血液体积的红细胞裂解液,并在室温或4℃条件下裂解4-5min。对于鼠的血液,裂解4-5min足够;对于人的外周血,宜延长裂解时间至10min,但通常不宜超过15min,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。后续步骤相同。
(四)血样样本快速操作步骤(无需洗涤)
1、新鲜抗凝血中加入10倍血液体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,室温或4℃裂解4-5min。(对于鼠的血液,裂解4-5min足够;对于人的外周血,宜延长裂解时间至10min,但通常不宜超过15min,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。)
2、加入20-30倍血液体积的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,混匀。400-500×g 4℃离心5min,弃红色上清。(如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。)
3、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
注:常规步骤,多一步洗涤过程的离心,但可以节省洗涤液的用量,洗涤效果也更好,同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心,但洗涤效果略差,同时需要大体积的离心管。
1、如果经过红细胞裂解液处理后的样品后续用于总RNA的提取,在处理细胞时不必使用经过DEPC 处理过的溶液。
2、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
3、实验员请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
4℃保存,一年有效。室温保存,3个月有效。
仅限科研使用,不能应用于临床。
红细胞裂解液
货号:UBI1015
规格:100ml
价格:90 元
应用范围: 裂解红细胞
产品类型: 裂解液
保存温度:4℃
产地: YOBIBIO
库存:
红细胞裂解液
货号:UBI1026
规格:500ml
价格:290 元
应用范围: 裂解红细胞
产品类型: 裂解液
保存温度:4℃
产地: YOBIBIO
库存:
红细胞裂解液
货号:
规格:
价格: 元
应用范围: 裂解红细胞
产品类型: 裂解液
保存温度:4℃
产地: YOBIBIO
库存:
红细胞裂解液
货号:
规格:
价格: 元
应用范围: 裂解红细胞
产品类型: 裂解液
保存温度:4℃
产地: YOBIBIO
库存:
红细胞裂解液
货号:
规格:
价格: 元
应用范围: 裂解红细胞
产品类型: 裂解液
保存温度:4℃
产地: YOBIBIO
库存: