产品描述：

攸碧艾的高效转染试剂U-300 Transfection Reagent是采用新型脂质体纳米颗粒技术，适用于将核酸（DNA和RNA）转染入真核细胞，转染性能卓越，可提高细胞活性，广泛适用于难转染的及常见的细胞种类。本转染试剂对细胞作用温和，毒性很低。

产品特点：

1、提供卓越的性能，以针对难转染的细胞系实现了较高转染效率的试剂。

2、转染试剂对细胞作用温和，毒性很低。

3、相比其他转染试剂具有更高的转染效率和更低的用量。

4、适用细胞更加广泛，有效转染难于转染的细胞系。

能有效转染的细胞类型包括：肺癌细胞（A549、NCI-H460）、骨肉瘤细胞（U-2OS、Saos-2）、结肠癌细胞（Caco2、SW480）、胰腺癌细胞（PANC-1）、皮肤黑色素瘤细胞（SK-MEL-28）成纤维细胞（3T3、COS-7）、肝细胞（HepG2、HuH7）红白血病细胞（K562）、乳腺癌细胞（MCF-7、Hs578T）前列腺癌细胞（LNCaP）、成肌细胞（C2C12、L6）等。

使用说明：

不同的细胞类型和不同面积的孔板转染操作略有不同，以六孔板的贴壁细胞DNA转染为例。
1、细胞准备：转染前一天将细胞接种至六孔板内，细胞接种数量视其生长速度和细胞系类型而定，一般为0.5-1×106个细胞。转染时要求细胞生长的汇合度为70-90%，转染前两小时对细胞进行换液。（细胞状态与转染效果影响很大，选择最佳细胞状态更有利于转染效率提高和转染后细胞状态的恢复）
2、将3.75μl和7.5μl的U33-300分别加至另外125μl无血清的OPTI-MEM培养基中，轻轻混匀，室温静置2-3min。
3、将5ug质粒DNA(0.5-5μg/μL)加入到250μl无血清OPTI-MEM培养基稀释，混匀，然后添加10ul B300试剂并充分混匀。
4、在每管已稀释的U33-300试剂中加入等体积已稀释的DNA室温孵育10-15min。
5、将DNA和U33-300混合液滴加至六孔板的孔内，前后左右晃动孔板混匀，置于培养箱中培养。
6、转染18-48小时后，倒置荧光显微镜下观察荧光蛋白表达，或加入抗性培养基筛选稳定表达细胞系单克隆。

注意事项：

1、转染siRNA至细胞时，遵循如上所述的DNA实验方案，但在稀释siRNA时不要加入B-300试剂。在无血清培养基中制备DNA-U33-300复合物，直接将其加入含细胞培养基的细胞中。

2、转染后无需去除转染复合物或者更换/添加培养。

3、整个实验过程避免细胞污染，由于不同细胞耐受性不同，我们建议您在做批量实验前，可根据实际质粒和细胞的转染效率，分不同梯度量先做预实验，摸索DNA和U33-300 Transfection Reagent 的最佳混合比例。步骤里面测试推荐的两种浓度的并非固定浓度，优化后可根据自身细胞情况调整用量。

4、本产品仅作体外科研使用，不可用于临床诊断或治疗。

5、实验员请穿实验服并佩戴一次性手套操作，注意有效防护，请勿接触人体。

保存方法：

4℃保存，2年有效，切勿冻存。冰袋或者湿冰运输，短时间内可室温运输，但需避免光源热源。

使用范围：

仅限科研使用，不能应用于临床。