产品中文名：小鼠AXL受体酪氨酸激酶(AXL)酶联免疫吸附测定试剂盒

指标别名：AXL Receptor Tyrosine Kinase；UFO; JTK11; Tyrosine-protein kinase receptor UFO

指标简介：AXL受体酪氨酸激酶（AXL），也被称为酪氨酸蛋白激酶受体UFO（UFO），是由AXL基因编码的酶。该基因最初被命名为UFO，这与它的功能不明有关。但是，自其被发现以来的几年中，对AXL的表达谱和机制的研究使其成为一个越来越有吸引力的目标，特别是对于癌症治疗而言。近年来，它已成为癌细胞免疫逃逸和耐药性的主要促进剂，可导致侵袭性和转移性癌症。它是一种细胞表面受体酪氨酸激酶，是TAM家族的一部分，包括TYRO3和MERTK。它的特征在于细胞外结构，由两个纤连蛋白3型重复序列和两个免疫球蛋白样重复序列及其细胞内酪氨酸激酶结构域组成。AXL受体通过结合维生素K依赖性蛋白生长停滞特异性基因6等生长因子将来自细胞外基质的信号转导到细胞质中。它参与刺激细胞增殖和存活。金属蛋白酶ADAM10和ADAM17对AXL细胞外结构域的蛋白水解裂可以下调这种信号传导活性。它在正常组织中表达，特别是在骨髓基质和骨髓细胞中，以及在肿瘤细胞和肿瘤脉管系统中。癌症中，它在肿瘤细胞以及邻近的免疫细胞（包括树突状细胞，巨噬细胞和NK细胞）上表达。它是先天免疫反应的抑制剂。

检测范围：31.2–2000pg/ml

灵敏度：＜5.67pg/ml

精密度：板内变异系数均＜9%，板间变异系数均＜10%

保存温度：4℃

有效期：6 个月

检测原理：本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒提供的酶标板已包被捕获抗体，实验时将待检样品（或标准品）加入酶标板反应孔中，捕获抗体结合目的蛋白。加入生物素标记检测抗体与目的蛋白结合，再加入 SABC 与标记抗体结合，形成捕获抗体-目的蛋白-检测抗体-SABC 免疫复合物，游离成分均被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB 在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在 450nm 波长处检测吸光度(OD)，目的蛋白浓度与 OD450 值之间呈正相关，通过绘制标准曲线计算出样品中目的蛋白的浓度。

样品的收集和保存：

1、血清：全血样品于室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 4℃，1,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或将上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

2、血浆：用 EDTA 或肝素钠抗凝管采集全血样品，采集后 30 分钟内置于 4℃冰箱，1,000×g 离心 15分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

3、组织匀浆：用预冷的 PBS (0.01mol/L， pH=7.4) 清洗组织，去除残留血液，冰上切割组织后称重。按组织重量(g): PBS 体积(ml) =1:9 的比例，加入 9 倍体积的 PBS（比如 1g 的组织样品加入 9ml 的 PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录），加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎以充分匀浆。最后将匀浆液于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测（如需要可取部分上清进行 BCA 蛋白定量）。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

4、细胞裂解液：贴壁细胞用预冷的 PBS 轻轻清洗，胰蛋白酶消化，1,000×g 离心 5 分钟后收集细胞；悬浮细胞可直接离心收集。收集到的细胞用预冷的 PBS 洗涤 3 次。PBS 稀释细胞悬液，细胞浓度达到10^6个/ml 左右。通过反复冻融或超声破碎使细胞裂解。4℃，3,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

5、细胞培养上清或其他生物体液：收集液体后于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。样本处理相关试剂推荐：PBS 缓冲液（货号：U21-259B），0.25%胰蛋白酶-EDTA 消化液（货号：U31-323C），0.25%胰蛋白酶消化液（货号：U31-324C）。

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