产品中文名：大鼠肝细胞生长因子(HGF)酶联免疫吸附测定试剂盒

指标别名：HGF; F-TCF; HGFB; HPTA; SF; Scatter Factor; Hepapoietin A; Fibroblast-Derived Tumor Cytotoxic Factor; Lung Fibroblast-Derived Mitogen

指标简介：肝细胞生长因子（HGF），也被称为分散因子（SF），是一种旁分泌细胞生长、运动和形态生成因子。它由间充质细胞和靶标分泌，主要作用于上皮细胞和内皮细胞，但也作用于造血祖细胞和T细胞。它在胚胎器官发育中具有重要作用。在与原致癌c-Met受体结合后，通过激活酪氨酸激酶信号级联反应来调节细胞生长、细胞运动和形态发生。它刺激有丝分裂、细胞运动和基质侵袭的能力使其在血管生成、肿瘤发生和组织再生中起着核心作用。它还调节T细胞进入心脏组织的趋化性。它与多种癌症有关，包括肺癌、胰腺癌、甲状腺癌、结肠癌和乳腺癌。它表达的增加与从口腔粘膜组织中分离的成纤维细胞的增强和无疤痕伤口愈合能力有关。

检测范围：62.5–4000pg/ml

灵敏度：＜11.36pg/ml

精密度：板内变异系数均＜9%，板间变异系数均＜10%

保存温度：4℃

有效期：6 个月

检测原理：本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒提供的酶标板已包被捕获抗体，实验时将待检样品（或标准品）加入酶标板反应孔中，捕获抗体结合目的蛋白。加入生物素标记检测抗体与目的蛋白结合，再加入 SABC 与标记抗体结合，形成捕获抗体-目的蛋白-检测抗体-SABC 免疫复合物，游离成分均被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB 在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在 450nm 波长处检测吸光度(OD)，目的蛋白浓度与 OD450 值之间呈正相关，通过绘制标准曲线计算出样品中目的蛋白的浓度。

样品的收集和保存：

1、血清：全血样品于室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 4℃，1,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或将上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

2、血浆：用 EDTA 或肝素钠抗凝管采集全血样品，采集后 30 分钟内置于 4℃冰箱，1,000×g 离心 15分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

3、组织匀浆：用预冷的 PBS (0.01mol/L， pH=7.4) 清洗组织，去除残留血液，冰上切割组织后称重。按组织重量(g): PBS 体积(ml) =1:9 的比例，加入 9 倍体积的 PBS（比如 1g 的组织样品加入 9ml 的 PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录），加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎以充分匀浆。最后将匀浆液于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测（如需要可取部分上清进行 BCA 蛋白定量）。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

4、细胞裂解液：贴壁细胞用预冷的 PBS 轻轻清洗，胰蛋白酶消化，1,000×g 离心 5 分钟后收集细胞；悬浮细胞可直接离心收集。收集到的细胞用预冷的 PBS 洗涤 3 次。PBS 稀释细胞悬液，细胞浓度达到10^6个/ml 左右。通过反复冻融或超声破碎使细胞裂解。4℃，3,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

5、细胞培养上清或其他生物体液：收集液体后于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。样本处理相关试剂推荐：PBS 缓冲液（货号：U21-259B），0.25%胰蛋白酶-EDTA 消化液（货号：U31-323C），0.25%胰蛋白酶消化液（货号：U31-324C）。

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