产品中文名：人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)酶联免疫吸附测定试剂盒

指标别名：AGP1；α1-AGP；a1AGP；ORM1; OMD 1; Orosomucoid 1

指标简介：Orosomucoid（ORM）或α-1-酸性糖蛋白（α1AGp，AGP 或 AAG）是一种存在于血浆中的急性期蛋白。它是一种α-球蛋白糖蛋白，由两个多态基因调控。它主要在肝细胞中合成，正常的血浆浓度在 0.6-1.2 毫克/毫升之间（1-3%的血浆蛋白）。血浆水平受怀孕、烧伤、某些药物和某些疾病的影响， 特别是艾滋病毒。ORM 唯一确定的功能是作为碱性和中性亲脂性化合物的载体。在医学上，它被称为碱性（带正电）药物（而白蛋白携带酸性（带负电）和中性药物）、类固醇和蛋白酶抑制剂的主要载体。衰老导致血浆白蛋白水平小幅下降；如果有的话，α-1 酸糖蛋白也会有小幅增加。然而，这些变化对药物蛋白结合和药物输送的影响似乎很小。AGP 显示出与甲状腺平衡的复杂互动。据观察，低浓度的 AGP 可刺激促甲状腺激素（TSH）受体和细胞内环状 AMP 的积累。然而，高浓度的 AGP 则抑制了 TSH 信号的传递。α-1 酸糖蛋白已被确定为估计全因死亡五年风险的四个潜在有用的循环生物标志物之一（其他三个是白蛋白、极低密度脂蛋白颗粒大小和柠檬酸盐）。Orosomucoid 在阻塞性黄疸中含量增加，而在肝细胞性黄疸和肠道感染中则减少。

精密度：板内变异系数均＜9%，板间变异系数均＜10%

保存温度：4℃

有效期：6 个月

检测原理：本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒提供的酶标板已包被捕获抗体，实验时将待检样品（或标准品）加入酶标板反应孔中，捕获抗体结合目的蛋白。加入生物素标记检测抗体与目的蛋白结合，再加入 SABC 与标记抗体结合，形成捕获抗体-目的蛋白-检测抗体-SABC 免疫复合物，游离成分均被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB 在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在 450nm 波长处检测吸光度(OD)，目的蛋白浓度与 OD450 值之间呈正相关，通过绘制标准曲线计算出样品中目的蛋白的浓度。

样品的收集和保存：

1、血清：全血样品于室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 4℃，1,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或将上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

2、血浆：用 EDTA 或肝素钠抗凝管采集全血样品，采集后 30 分钟内置于 4℃冰箱，1,000×g 离心 15分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

3、组织匀浆：用预冷的 PBS (0.01mol/L， pH=7.4) 清洗组织，去除残留血液，冰上切割组织后称重。按组织重量(g): PBS 体积(ml) =1:9 的比例，加入 9 倍体积的 PBS（比如 1g 的组织样品加入 9ml 的 PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录），加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎以充分匀浆。最后将匀浆液于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测（如需要可取部分上清进行 BCA 蛋白定量）。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

4、细胞裂解液：贴壁细胞用预冷的 PBS 轻轻清洗，胰蛋白酶消化，1,000×g 离心 5 分钟后收集细胞；悬浮细胞可直接离心收集。收集到的细胞用预冷的 PBS 洗涤 3 次。PBS 稀释细胞悬液，细胞浓度达到10^6个/ml 左右。通过反复冻融或超声破碎使细胞裂解。4℃，3,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

5、细胞培养上清或其他生物体液：收集液体后于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。样本处理相关试剂推荐：PBS 缓冲液（货号：U21-259B），0.25%胰蛋白酶-EDTA 消化液（货号：U31-323C），0.25%胰蛋白酶消化液（货号：U31-324C）。

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