产品中文名：大鼠酪氨酸激酶B(TrkB)酶联免疫吸附测定试剂盒

指标别名：GP145-TrkB; NTRK2; BDNF/NT-3 growth factors receptor; Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2; Tropomyosin-related kinase B; TrkB tyrosine kinase

指标简介：原肌球蛋白受体激酶 B（TrkB），又称酪氨酸受体激酶 B，或 BDNF/NT-3 生长因子受体或神经营养酪氨酸激酶，受体，2 型是一种蛋白质，由 NTRK2 基因编码。TrkB 是脑源性神经营养因子（BDNF）的受体。原肌球蛋白受体 激酶 B 是几种"神经营养素"的高亲和力催化受体，神经营养素是诱导不同细 胞群生存和分化的小蛋白生长因子。激活 TrkB 的神经营养素是：BDNF（脑 源性神经营养因子）、神经营养素-4（NT-4）和神经营养素-3（NT-3）。 因此，TrkB 介导这些神经营养因子的多种作用，其中包括神经元分化和生存。 TrkB 受体的激活可导致中枢神经系统细胞中 KCC2 氯离子转运体的下调。除 了该途径在神经元发育中的作用外，BDNF 信号也是通过星形细胞 TrkB.T1 异构体对星形细胞的正常形态发生和成熟的必要条件。

精密度：板内变异系数均＜9%，板间变异系数均＜10%

保存温度：4℃

有效期：6 个月

检测原理：本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒提供的酶标板已包被捕获抗体，实验时将待检样品（或标准品）加入酶标板反应孔中，捕获抗体结合目的蛋白。加入生物素标记检测抗体与目的蛋白结合，再加入 SABC 与标记抗体结合，形成捕获抗体-目的蛋白-检测抗体-SABC 免疫复合物，游离成分均被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB 在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在 450nm 波长处检测吸光度(OD)，目的蛋白浓度与 OD450 值之间呈正相关，通过绘制标准曲线计算出样品中目的蛋白的浓度。

样品的收集和保存：

1、血清：全血样品于室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 4℃，1,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或将上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

2、血浆：用 EDTA 或肝素钠抗凝管采集全血样品，采集后 30 分钟内置于 4℃冰箱，1,000×g 离心 15分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

3、组织匀浆：用预冷的 PBS (0.01mol/L， pH=7.4) 清洗组织，去除残留血液，冰上切割组织后称重。按组织重量(g): PBS 体积(ml) =1:9 的比例，加入 9 倍体积的 PBS（比如 1g 的组织样品加入 9ml 的 PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录），加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎以充分匀浆。最后将匀浆液于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测（如需要可取部分上清进行 BCA 蛋白定量）。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

4、细胞裂解液：贴壁细胞用预冷的 PBS 轻轻清洗，胰蛋白酶消化，1,000×g 离心 5 分钟后收集细胞；悬浮细胞可直接离心收集。收集到的细胞用预冷的 PBS 洗涤 3 次。PBS 稀释细胞悬液，细胞浓度达到10^6个/ml 左右。通过反复冻融或超声破碎使细胞裂解。4℃，3,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

5、细胞培养上清或其他生物体液：收集液体后于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。样本处理相关试剂推荐：PBS 缓冲液（货号：U21-259B），0.25%胰蛋白酶-EDTA 消化液（货号：U31-323C），0.25%胰蛋白酶消化液（货号：U31-324C）。

咨询热线：400-681-8582 021-64228065

温馨提示：本公司所有产品仅供科学研究使用，不得用于其他用途！