产品中文名：人高密度脂蛋白(HDL)酶联免疫吸附测定试剂盒

指标别名：High Density Lipoprotein

指标简介：高密度脂蛋白（HDL）是五大类脂蛋白之一。脂蛋白是由多种蛋白质组成的复杂颗粒，在细胞外的水中将所有脂肪分子（脂质）运送到身体周围。它们通常由每粒80-100个蛋白质组成（由一个、两个或三个载脂蛋白A组织。高密度脂蛋白颗粒在血液中循环时扩大，聚集更多的脂肪分子），每个颗粒可运输多达数百个脂肪分子。脂蛋白按密度/大小分为5个亚组（反比关系），这也与功能和心血管事件的发生率相关。与较大的脂蛋白颗粒将脂肪分子输送到细胞不同，高密度脂蛋白颗粒将脂肪分子从细胞中移除。携带的脂质包括胆固醇、磷脂和甘油三酯，每一种的数量都是可变的。增加高密度脂蛋白颗粒的浓度与动脉壁内动脉粥样硬化的积累减少有关，降低了斑块突然破裂、心血管疾病、中风和其他血管疾病的风险。高密度脂蛋白颗粒通常被称为 "好胆固醇"，因为它们将脂肪分子运送出动脉壁，减少巨噬细胞的积累，从而有助于防止甚至逆转动脉粥样硬化。

精密度：板内变异系数均＜9%，板间变异系数均＜10%

保存温度：4℃

有效期：6 个月

检测原理：本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒提供的酶标板已包被捕获抗体，实验时将待检样品（或标准品）加入酶标板反应孔中，捕获抗体结合目的蛋白。加入生物素标记检测抗体与目的蛋白结合，再加入 SABC 与标记抗体结合，形成捕获抗体-目的蛋白-检测抗体-SABC 免疫复合物，游离成分均被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB 在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在 450nm 波长处检测吸光度(OD)，目的蛋白浓度与 OD450 值之间呈正相关，通过绘制标准曲线计算出样品中目的蛋白的浓度。

样品的收集和保存：

1、血清：全血样品于室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 4℃，1,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或将上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

2、血浆：用 EDTA 或肝素钠抗凝管采集全血样品，采集后 30 分钟内置于 4℃冰箱，1,000×g 离心 15分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

3、组织匀浆：用预冷的 PBS (0.01mol/L， pH=7.4) 清洗组织，去除残留血液，冰上切割组织后称重。按组织重量(g): PBS 体积(ml) =1:9 的比例，加入 9 倍体积的 PBS（比如 1g 的组织样品加入 9ml 的 PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录），加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎以充分匀浆。最后将匀浆液于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测（如需要可取部分上清进行 BCA 蛋白定量）。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

4、细胞裂解液：贴壁细胞用预冷的 PBS 轻轻清洗，胰蛋白酶消化，1,000×g 离心 5 分钟后收集细胞；悬浮细胞可直接离心收集。收集到的细胞用预冷的 PBS 洗涤 3 次。PBS 稀释细胞悬液，细胞浓度达到10^6个/ml 左右。通过反复冻融或超声破碎使细胞裂解。4℃，3,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

5、细胞培养上清或其他生物体液：收集液体后于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。样本处理相关试剂推荐：PBS 缓冲液（货号：U21-259B），0.25%胰蛋白酶-EDTA 消化液（货号：U31-323C），0.25%胰蛋白酶消化液（货号：U31-324C）。

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