产品中文名: 绵羊白细胞介素12 p70亚基(IL-12 P70)酶联免疫吸附测定试剂盒
指标别名:CLMF; CLMF p35; IL 12 subunit p35; IL 12A; IL-12; IL12 p70; IL-12 p70; IL12A; IL-12A; IL12p70; IL12-p70; Interleukin 12 subunit alpha; NFSK; NKSF1; P35
指标简介:白细胞介素12(IL-12)主要由活化的巨噬细胞、树突状细胞和中性粒细胞产生,有致炎作用和免疫调节作用。IL-12又名NK细胞刺激因子(nature killer stimulating factor,NKSF)、细胞毒性淋巴细胞成熟因子(cytotoxic lymphocyte maturation factor,CLMF)。 IL-12的体外效应:IL-12能诱导PHA刺激的T细胞增殖。IL-12能增加CD56+NK细胞的活性;诱导NK细胞或PBMC增殖和产生LAK活性,增加NK细胞表达表面分子(IL-2Rα、TNFR、CD56、CD2、CD11a、CD54、CD25、CD69、CD71和HLA-DR);促进NK细胞产生IFN-γ和TNF-α(TGF-β和IL-10抑制该效应)。IL-12在BCG和LPS诱导的小鼠炎性休克所致的死亡中起重要作用。IL-12通过诱导TNF- α和IFN-γ,抑制骨髓造血。IL-12还有抗血管生成作用。 IL-12的体内效应:将IL-12输入动物体内可以增强NK细胞的杀伤活性、增加IFN-γ分泌、启动造血细胞大量生成、增强异体排斥反应并可能介导抗肿瘤效应。IL-12在某些Th1介导的自身免疫疾病中起重要作用。IL-12诱导动物脾肿大,其中含有大量造血细胞,红细胞系、髓样细胞系和巨核细胞系都增加。IL-2抑制骨髓造血的作用可能与诱导NK细胞产生IFN-γ等有关。在小鼠肿瘤模型中,IL-12的抗肿瘤作用依赖IFN-γ的增加,且与IL-2、IFN-α以及一些化学治疗药物有协同抗肿瘤作用。
精密度:板内变异系数均<9%,板间变异系数均<10%
保存温度:4℃
有效期:6 个月
检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒提供的酶标板已包被捕获抗体,实验时将待检样品(或标准品)加入酶标板反应孔中,捕获抗体结合目的蛋白。加入生物素标记检测抗体与目的蛋白结合,再加入 SABC 与标记抗体结合,形成捕获抗体-目的蛋白-检测抗体-SABC 免疫复合物,游离成分均被洗去。加入显色底物(TMB),TMB 在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在 450nm 波长处检测吸光度(OD),目的蛋白浓度与 OD450 值之间呈正相关,通过绘制标准曲线计算出样品中目的蛋白的浓度。
样品的收集和保存:
1、血清:全血样品于室温放置 2 小时或 4℃过夜,然后 4℃,1,000×g 离心 15 分钟,取上清即可检测。或将上清置于≤ -20℃冷冻保存,避免反复冻融。
2、血浆:用 EDTA 或肝素钠抗凝管采集全血样品,采集后 30 分钟内置于 4℃冰箱,1,000×g 离心 15分钟,取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存,避免反复冻融。
3、组织匀浆:用预冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.4) 清洗组织,去除残留血液,冰上切割组织后称重。按组织重量(g): PBS 体积(ml) =1:9 的比例,加入 9 倍体积的 PBS(比如 1g 的组织样品加入 9ml 的 PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录),加入玻璃匀浆器中,在冰上充分研磨。可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎以充分匀浆。最后将匀浆液于 4℃,3000×g 离心 15 分钟,取上清即可检测(如需要可取部分上清进行 BCA 蛋白定量)。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存,避免反复冻融。
4、细胞裂解液:贴壁细胞用预冷的 PBS 轻轻清洗,胰蛋白酶消化,1,000×g 离心 5 分钟后收集细胞;悬浮细胞可直接离心收集。收集到的细胞用预冷的 PBS 洗涤 3 次。PBS 稀释细胞悬液,细胞浓度达到10^6个/ml 左右。通过反复冻融或超声破碎使细胞裂解。4℃,3,000×g 离心 15 分钟,取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存,避免反复冻融。
5、细胞培养上清或其他生物体液:收集液体后于 4℃,3000×g 离心 15 分钟,取上清即可检测。样本处理相关试剂推荐:PBS 缓冲液(货号:U21-259B),0.25%胰蛋白酶-EDTA 消化液(货号:U31-323C),0.25%胰蛋白酶消化液(货号:U31-324C)。
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Sheep IL-12 p70 Elisa Kit
货号:U96-9048E
规格:96T
价格:2909 元
检测物种: sheep
应用范围: 6.2-400ng/ml
产品类型: 检测试剂盒
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产地: YOBIBIO
库存:现货
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