产品中文名:人衰变加速因子(DAF/CD55)酶联免疫吸附测定试剂盒
指标别名:DAF; CR; TC; Complement decay-accelerating factor; Decay Accelerating Factor
指标简介:衰变加速因子又称CD55或DAF,是一种蛋白质,它调节着细胞表面的补体 系统。它能识别C4b和C3b片段,这些片段是在激活C4(经典或凝集素途径) 或C3(替代途径)时产生的。它与经典和凝集素途径的细胞相关C4b相互作 用,干扰C2向C2b的转化,从而防止C4b2a C3转化酶的形成,它与替代途径 的C3b相互作用,干扰D因子将B因子转化为Bb,从而防止替代途径的C3bBb C3转化酶的形成。因此,通过限制补体级联的扩增转化酶,DAF间接地阻 止了膜攻击复合物的形成。这种糖蛋白广泛分布于造血细胞和非造血细胞中。 它是克罗默血型系统的一个决定因素。
检测范围:0.78—50ng/ml
灵敏度:<0.31ng/ml
精密度:板内变异系数均<9%,板间变异系数均<10%
保存温度:4℃
有效期:6 个月
检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒提供的酶标板已包被捕获抗体,实验时将待检样品(或标准品)加入酶标板反应孔中,捕获抗体结合目的蛋白。加入生物素标记检测抗体与目的蛋白结合,再加入 SABC 与标记抗体结合,形成捕获抗体-目的蛋白-检测抗体-SABC 免疫复合物,游离成分均被洗去。加入显色底物(TMB),TMB 在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在 450nm 波长处检测吸光度(OD),目的蛋白浓度与 OD450 值之间呈正相关,通过绘制标准曲线计算出样品中目的蛋白的浓度。
样品的收集和保存:
1、血清:全血样品于室温放置 2 小时或 4℃过夜,然后 4℃,1,000×g 离心 15 分钟,取上清即可检测。或将上清置于≤ -20℃冷冻保存,避免反复冻融。
2、血浆:用 EDTA 或肝素钠抗凝管采集全血样品,采集后 30 分钟内置于 4℃冰箱,1,000×g 离心 15分钟,取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存,避免反复冻融。
3、组织匀浆:用预冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.4) 清洗组织,去除残留血液,冰上切割组织后称重。按组织重量(g): PBS 体积(ml) =1:9 的比例,加入 9 倍体积的 PBS(比如 1g 的组织样品加入 9ml 的 PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录),加入玻璃匀浆器中,在冰上充分研磨。可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎以充分匀浆。最后将匀浆液于 4℃,3000×g 离心 15 分钟,取上清即可检测(如需要可取部分上清进行 BCA 蛋白定量)。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存,避免反复冻融。
4、细胞裂解液:贴壁细胞用预冷的 PBS 轻轻清洗,胰蛋白酶消化,1,000×g 离心 5 分钟后收集细胞;悬浮细胞可直接离心收集。收集到的细胞用预冷的 PBS 洗涤 3 次。PBS 稀释细胞悬液,细胞浓度达到10^6个/ml 左右。通过反复冻融或超声破碎使细胞裂解。4℃,3,000×g 离心 15 分钟,取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存,避免反复冻融。
5、细胞培养上清或其他生物体液:收集液体后于 4℃,3000×g 离心 15 分钟,取上清即可检测。样本处理相关试剂推荐:PBS 缓冲液(货号:U21-259B),0.25%胰蛋白酶-EDTA 消化液(货号:U31-323C),0.25%胰蛋白酶消化液(货号:U31-324C)。
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Human CD55 Elisa Kit
货号:U96-2611E
规格:96T
价格:2909 元
检测物种: Human
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产地: YOBIBIO
库存:现货
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