产品中文名：小鼠可溶性白介素6受体(sIL-6R)酶联免疫吸附测定试剂盒

指标别名：IL-6R;CD126; gp80; IL6R; IL-6R-1; IL-6R-Alpha; IL6RA; IL-6 receptor subunit alpha; Membrane glycoprotein 80; IL6R; Interleukin 6 Receptor

指标简介：sIL-6R（可溶性白细胞介素-6受体）‌ 是 IL-6（白细胞介素-6）信号通路中的关键调控分子，由膜结合型 IL-6 受体（mIL-6R）通过蛋白水解裂解或基因选择性剪接产生，可自由存在于体液中（如血清、血浆、脑脊液等）‌。sIL-6R 与 IL-6 结合后，可激活表达 gp130 但不表达 mIL-6R 的细胞（如内皮细胞、成纤维细胞、神经元等），从而‌扩展 IL-6 的作用范围‌‌。在慢性炎症、自身免疫病（如类风湿关节炎、溃疡性结肠炎）及某些肿瘤（如三阴性乳腺癌、多发性骨髓瘤）中，sIL-6R 介导的反式信号常促进疾病进展‌。经典信号仅发生在表达 mIL-6R 的细胞（如肝细胞、单核细胞）；而反式信号可作用于更广泛组织，且在病理状态下更显著‌。sIL-6R 水平升高与类风湿关节炎、Castleman 病、新冠肺炎重症、缺血性卒中等密切相关‌。sIL-6R 是 IL-6 信号的‌关键放大器‌，通过反式信号传导参与多种炎症与免疫相关疾病，既是‌潜在生物标志物‌，也是‌新兴治疗靶点‌。

检测范围：31.2–2000pg/ml

灵敏度：＜6.25pg/ml

精密度：板内变异系数均＜9%，板间变异系数均＜10%

保存温度：4℃

有效期：6 个月

检测原理：本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒提供的酶标板已包被捕获抗体，实验时将待检样品（或标准品）加入酶标板反应孔中，捕获抗体结合目的蛋白。加入生物素标记检测抗体与目的蛋白结合，再加入 SABC 与标记抗体结合，形成捕获抗体-目的蛋白-检测抗体-SABC 免疫复合物，游离成分均被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB 在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在 450nm 波长处检测吸光度(OD)，目的蛋白浓度与 OD450 值之间呈正相关，通过绘制标准曲线计算出样品中目的蛋白的浓度。

样品的收集和保存：

1、血清：全血样品于室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 4℃，1,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或将上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

2、血浆：用 EDTA 或肝素钠抗凝管采集全血样品，采集后 30 分钟内置于 4℃冰箱，1,000×g 离心 15分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

3、组织匀浆：用预冷的 PBS (0.01mol/L， pH=7.4) 清洗组织，去除残留血液，冰上切割组织后称重。按组织重量(g): PBS 体积(ml) =1:9 的比例，加入 9 倍体积的 PBS（比如 1g 的组织样品加入 9ml 的 PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录），加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎以充分匀浆。最后将匀浆液于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测（如需要可取部分上清进行 BCA 蛋白定量）。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

4、细胞裂解液：贴壁细胞用预冷的 PBS 轻轻清洗，胰蛋白酶消化，1,000×g 离心 5 分钟后收集细胞；悬浮细胞可直接离心收集。收集到的细胞用预冷的 PBS 洗涤 3 次。PBS 稀释细胞悬液，细胞浓度达到10^6个/ml 左右。通过反复冻融或超声破碎使细胞裂解。4℃，3,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

5、细胞培养上清或其他生物体液：收集液体后于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。样本处理相关试剂推荐：PBS 缓冲液（货号：U21-259B），0.25%胰蛋白酶-EDTA 消化液（货号：U31-323C），0.25%胰蛋白酶消化液（货号：U31-324C）。

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